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Disolventes y aditivos en HPLC: cuando lo invisible causa problemas

En esta entrada abordamos por qué el degasificado de la fase móvil es esencial para lograr resultados estables y precisos en HPLC. Analizamos los efectos de los gases disueltos en el análisis cromatográfico —como ruido en la línea base, variaciones de retención o burbujas en el sistema— y explicamos las técnicas más comunes para eliminarlos, desde el degasificado en línea hasta el uso de helio o la sonicación. También incluimos consejos prácticos sobre el almacenamiento de disolventes y buenas prácticas para evitar errores.


En cromatografía líquida, hay detalles que no se ven… pero se notan. Uno de los más comunes (y a menudo subestimados) es la calidad de los disolventes y aditivos que se utilizan en la fase móvil. Aunque a simple vista parezcan correctos, si no tienen la pureza adecuada pueden comprometer por completo tu análisi s.

¿Por qué importa tanto la pureza?

Porque los contaminantes —incluso en trazas— pueden provocar:

    • Líneas base inestables

    • Picos no deseados (los famosos ghost peaks)

    • Baja sensibilidad en la detección

    • Daños en la columna o el sistema

Cada método analítico tiene sus exigencias. En aplicaciones con gradiente, por ejemplo, los disolventes deben ser de grado específico para garantizar resultados reproducibles. Y si trabajas con espectrometría de masas, usar disolventes LC-MS no es opcional: es imprescindible.

El agua: ¿pura de verdad?

El agua que usas en tus análisis debe ser más que "limpia". Idealmente, debe ser ultrapura y adaptada a tus necesidades (HPLC o LC-MS grade). Sistemas de purificación especializados aseguran que esté libre de contaminantes inorgánicos y orgánicos, algo que un simple desionizador no garantiza. Ojo: muchas veces, el agua es la mayor fuente de ruido en el sistema y no lo sabes.

Buffers y soluciones: lo reciente y bien filtrado, siempre mejor

Los buffers envejecidos o mal almacenados también son un riesgo. Además de degradarse con el tiempo, pueden servir de cultivo para microorganismos. Para evitarlo:

    • Prepara las soluciones justo antes del análisis.

    • Filtra siempre: 0,22 μm si usas UHPLC, 0,45 μm para HPLC convencional.

    • Añadir un pequeño porcentaje de disolvente orgánico o conservantes como azida sódica puede marcar la diferencia.

 

 

Errores humanos: tan comunes como evitables

Tapones mal cerrados, frascos abiertos en la bancada durante horas, devolver solventes al frasco original o usar reactivos caducados… Son gestos pequeños, pero sus consecuencias pueden ser grandes. Y lo peor: muchas veces no sabrás de dónde viene el problema hasta que es demasiado tarde.


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¿Por qué QuantumScale es un punto de inflexión?

QuantumScale redefine lo que es posible en el RNA-seq de célula única, eliminando barreras tradicionales como el coste, la escalabilidad y la complejidad de los flujos de trabajo. Su tecnología permite analizar desde pequeños estudios piloto hasta proyectos de millones de células en un mismo sistema, con un proceso optimizado y altamente reproducible.

 

Principales ventajas de QuantumScale 

Flexibilidad total: adapta el análisis a las necesidades del proyecto, con kits que procesan desde 84,000 hasta 4 millones de células por ejecución.

 Mayor eficiencia: su protocolo optimizado reduce en más de un 75% el tiempo de manipulación sin necesidad de equipos especializados.

Multiplexación avanzada con ScalePlex: permite analizar hasta 9,000 muestras o condiciones en una sola ejecución, facilitando estudios multitemporales o comparativos.

Alto rendimiento: con mayor sensibilidad en la detección de transcritos y hasta un 70% de recuperación celular, garantizando datos de alta calidad con bajos niveles de multiplets.

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¿Cómo puede transformar tu investigación?

QuantumScale no solo es una solución para los retos actuales del RNA-seq de célula única, sino que abre nuevas posibilidades para estudios más ambiciosos. Ya sea que trabajes con poblaciones celulares raras, estudios de atlas celulares o experimentos longitudinales, esta tecnología permite explorar la biología celular con una precisión sin precedentes.

Si buscas llevar tu análisis de célula única al siguiente nivel, QuantumScale es la herramienta que estabas esperando.

 

 

📢 Contáctanos para cualquier duda o consulta.

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