La solución de potenciador de betaína 5 M es uno de los aditivos más efectivos en una amplia gama de plantillas diferentes, incluidas las secuencias y plantillas ricas en GC y las plantillas que se sabe que son extremadamente difíciles de amplificar. La solución de potenciador de betaína 5 M reduce la temperatura de fusión del ADN y tiene un efecto mejorado en la polimerasa.
características
- Mejora la amplificación en objetivos de ADN ricos en GC y difíciles
- reduce la temperatura de fusión
Descripción
El rendimiento de la solución de potenciador de betaína 5 M es superior en comparación con los potenciadores estándar como formamida, DMSO, TMAC, BSA y detergentes no iónicos. La solución de potenciador betaína es un excelente potenciador, especialmente cuando se usa con regiones o plantillas ricas en GC con un alto grado de estructuras secundarias.
En detalle, Betaine se une preferentemente a secuencias ricas en el surco principal, estabilizando así en regiones ricas del ADN. Debido a que en las formas 2 enlaces de hidrógeno y GC Forms 3, el enlace de AT es menos estable que el de GC. Como consecuencia del efecto estabilizador de la betaína en la unión, la estabilidad de la unión y la unión GC se acerca a un nivel igual. Al mismo tiempo, Betaine tiene un efecto desestabilizador independiente de secuencia en todo el ADN. Resumido, el t m de las secuencias ricas en Rich y GC se iguala y se reduce la t m general. Además, la betaína ayuda a la procesividad de las polimerasas termoestables y reduce las "pausas" en la polimerización causada por la estructura secundaria que puede inducir la polimerasa a disociarse de la cadena de ADN.
Betaine tiene un efecto decreciente sobre la temperatura de fusión del ADN y los cebadores. Por lo tanto, las temperaturas de desnaturalización y las temperaturas de recocido de imprimación deben reducirse en 1 €: 5 ° C. La temperatura de recocido óptima debe determinarse individualmente para cada reacción.